中文摘要: 目的:探讨条件性敲除3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)基因对大鼠行为、认知功能及微管相关蛋白tau的影响,为阿尔茨海默病(AD)发病机制的研究提供参考。方法:选取SD大鼠90只,随机分为三组(每组30只):模型组大鼠采用Cre-loxP技术条件性敲除PDK1基因;阳性对照组大鼠采用Cre-loxP技术条件敲除大鼠PDK1基因之后,构建载有PDK1基因的慢病毒质粒LV-PDK1,并将PDK1基因重新敲入;阴性对照组不作处理。比较三组大鼠3、5、8月龄时各组运动能力及认知功能。采用Morris 水迷宫观察和评价大鼠学习记忆及运动能力的改变;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测三组大鼠3、5、8月龄时脑脊液中磷酸化tau蛋白(P-tau)的含量;8月龄时处死大鼠取脑组织,采用Western blot法检测tau蛋白在Ser396、Ser199/202、Thr205三个位点的磷酸化水平(P-tau蛋白相对表达水平)。结果:(1)Morris 水迷宫检测结果:在3、5、8月龄时,模型组大鼠运动能力及认知水平逐渐降低,且明显低于阴性、阳性对照组(P均<0.05)。(2)ELISA检测结果:在8月龄时,模型组脑脊液中P-tau蛋白浓度较3、5月龄时明显升高(P均<0.05),且各月龄时P tau蛋白含量均明显高于阴性、阳性对照组(P均<0.05)。(3)Western blot法检测结果:模型组脑组织中tau蛋白在Ser396、Ser199/202二个位点的磷酸化水平均高于阴性、阳性对照组(P均<0.05),在Thr205位点三组间磷酸化水平相近(P>0.05)。结论:PDK1基因可能参与了tau蛋白在Ser396、Ser199/202二个位点磷酸化水平的调控,并通过对P-tau蛋白的调控,影响大鼠运动能力及认知水平。tau蛋白磷酸化水平高低与大鼠运动能力及认知水平有一定相关性,可能与AD的发病机制有关。