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中国临床研究英文版:2016,29(7):896-899,903
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沉默SETDB1对肾癌细胞生长的影响及分子机制研究
(淮安市第一人民医院肾内科,江苏 淮安 223300)
摘要
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   Published Online:May 25, 2018
中文摘要: 目的:探讨组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型1(SETDB1)对人肾癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养肾癌ACHN细胞及正常肾小管上皮HK-2细胞,qRT-PCR及Western blot分别检测两种细胞系中SETDB1 mRNA及蛋白的表达。采用转染SETDB1特异性干扰性小核糖核酸(siRNA)敲低ACHN细胞中SETDB1表达,并采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测SETDB1的敲低效果,CCK-8法、溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)结合试验检测细胞活力与增殖,流式细胞仪、caspase3/7活性分析检测细胞凋亡的变化。采用qRT-PCR、Western blot检测沉默SETDB1后p53 mRNA及蛋白的表达水平。结果:SETDB1在肾癌ACHN细胞中表达水平明显高于正常肾小管上皮HK-2细胞(t=14.435,P<0.01);转染SETDB1特异性siRNA沉默SETDB1表达后,ACHN细胞中SETDB1 mRNA(t=13.091,P<0.01)及其蛋白表达水平明显降低;ACHN细胞活力显著降低(P<0.05);细胞内DNA复制活性明显降低(P<0.01);细胞凋亡率增加(t=6.765,P<0.01);Csapase3/7酶活性提高(t=5.763,P<0.01);同时p53 mRNA(t=9.241,P<0.01)及蛋白的表达水平显著提高。结论:SETDB1在肾癌细胞中表达升高,下调SETDB1能够通过促进p53表达而发挥抗肿瘤生长作用。
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文章编号:     中图分类号:R-33 R737.11    文献标志码:
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