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Published Online:June 26, 2018
Published Online:June 26, 2018
中文摘要: 目的:研究微小核糖核酸(microRNA-5p,miR)-17-5p通过靶向调节细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)对鼻咽癌细胞株CNE2增殖的影响。方法:将miR-17-5p 模拟物(mimics)转染人鼻咽癌细胞系CNE2,使用定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测miR-17-5p对CDKN1A的影响;生物信息学预测miR-17-5p是否有CDKN1A的结合位点;荧光素酶实验检测miR-17-5p 是否可靶向调节CDKN1A;通过Western blot和克隆形成实验验证miR17-5p可否通过调节CDKN1A影响鼻咽癌细胞株CNE2的增殖。结果:Western blot和qRT-PCR实验显示,在蛋白水平和mRNA水平与对照组相比,过表达miR-17-5p可降低 CDKN1A的表达(P<0.01);Target scan靶基因预测软件分析发现,在CDKN1A 的3′UTR有两处miR-17-5p的结合位点;荧光素酶检测结果证实miR-17-5p可特异性的作用于这两个位点;克隆形成实验显示,Western blot和qRT-PCR实验显示,在蛋白水平和mRNA水平,过表达miR-17-5p可显著提高CNE2细胞的克隆形成率(P<0.05),同时过表达miR-17-5p和CDKN1A,则抵消了miR-17-5p对细胞增殖的影响(P<0.05)。结论:CDKN1A是miR-17-5p的靶基因,miR-17-5p通过靶向性抑制CDKN1A的表达可促进鼻咽癌细胞的增殖。
中文关键词: 鼻咽癌 细胞增殖 微小核糖核酸-17-5p 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A 靶基因 结合位点 克隆形成
Abstract:
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文章编号: 中图分类号:R739.6 R-33 文献标志码:
基金项目:国家自然科学基金(81301939);中国博士后基金(2015M570698)
Author Name | Affiliation |
王雯珺1,郭敏章1,列璞怡1,伍思培2 | 1.广州医科大学第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室 转化医学实验室,广东 广州 510120 2.广东省人民医院肿瘤中心 广东省医学科学院 广东省肺癌研究所,广东 广州 510080 |
Author Name | Affiliation |
王雯珺1,郭敏章1,列璞怡1,伍思培2 | 1.广州医科大学第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室 转化医学实验室,广东 广州 510120 2.广东省人民医院肿瘤中心 广东省医学科学院 广东省肺癌研究所,广东 广州 510080 |
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