中文摘要: 摘要:目的 探讨心理应激诱导还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NADPH oxidase 4,Nox-4)介导的炎症因子表达及其在食管炎症发生中的作用。 方法 雄性SPF级20只昆明小鼠随机分为慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组,每组10只。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d。HE染色在光镜下观察食管黏膜组织病理学改变,免疫组化法和蛋白质印迹(WB)法检测小鼠食管中氧化应激指标Nox-4蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测食管黏膜组织中Nox-4、抗氧化蛋白［核因子E2相关因子2(Nrf-2)、Ⅰ型血红素氧合酶(HO-1)］及炎症因子［单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α］等mRNA的相对表达量。 结果 HE染色光镜下发现,Stress组小鼠食管黏膜层出现基底细胞增生,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞等免疫细胞出现浸润反应和炎症性改变,而Control组小鼠食管全层未发现明显异常。食管黏膜组织损伤评分结果显示,Stress组小鼠食管黏膜损伤及黏膜下炎症细胞评分明显高于Control组(P<0.01)。免疫组化结果显示,Nox-4主要表达于食管固有层、黏膜及黏膜下层,Nox-4免疫染色阳性着色细胞在Stress组小鼠组织中较Control组染色深且丰富。Stress组小鼠食管黏膜中Nox-4 mRNA水平是Control组的(2.45±0.58)倍,其蛋白表达水平为Control组的(2.39±0.43)倍(P均<0.01)。Control组Nrf-2 mRNA表达水平为Stress组的(1.75±0.24)倍,HO-1的mRNA水平为Stress组的(1.81±0.31)倍(P均<0.01)。Real-time PCR实验结果显示,Stress组食管组织炎症因子MCP-1、IL-6、IL-8、TNF-α等mRNA表达水平明显上升,分别是Control组的(1.68±0.33)、(2.42±0.41)、(2.39±0.28)和(2.47±0.52)倍(P均<0.01)。 结论 心理应激可能直接导致食管氧化/抗氧化系统的平衡失调,使得促炎因子过量表达,进而引起食管炎症反应。