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网络发布日期:2019-02-20
网络发布日期:2019-02-20
中文摘要: 目的 探究慢病毒介导神经生长因子(NGF)过表达转染促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞转化的作用。方法 体外分离,培养人BMSCs,利用基因过表达技术,构建NGF过表达慢病毒载体转染BMSCs。根据转染情况分成3组,空白对照组(未转染慢病毒载体的BMSCs)、空白载体病毒组(转染不含NGF过表达慢病毒载体的BMSCs)和过表达载体病毒组(转染过表达NGF慢病毒载体的BMSCs)。利用流式细胞仪检测BMSCs的表面标记物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测神经细胞表面蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE) mRNA及蛋白的表达。结果 (1)BMSCs的表面蛋白标记物CD44和CD29在第2代BMSCs的表达为60.2%和58.3%,CD34和CD45在第2代BMSCs的表达为3.4%和2.6%。(2)慢病毒转染效率为90%以上。转染效率较高。(3)空白对照组、空白载体病毒组和过表达载体病毒组的GFAP和NSE mRNA的相对表达量三组比较有统计学差异(P<0.05);其中空白载体病毒组和空白对照组的组间比较无统计学差异(P>0.05);过表达载体病毒组高于空白载体病毒组,组间比较有统计学差异(P<0.05)。Western blot检测蛋白表达量也具有同样的表达特点。结论 慢病毒介导NGF过表达转染促进BMSCs可以提高BMSCs向神经细胞转化的效率,可以为神经损伤和脊髓损伤提供种子细胞。
中文关键词: 神经生长因子 骨髓间充质干细胞 慢病毒转染 胶质纤维酸性蛋白 神经元特异性烯醇化酶
Abstract:
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文章编号: 中图分类号: 文献标志码:
基金项目:国家自然科学基金(81802203);中央高校基本科研业务费专项资金(2042017KF0139)
作者 | 单位 |
邓明1, 谢萍2, 马永刚1, 明江华1, 周炎1, 陈庆1, 刘志勇3, 刘世清1 | 1.武汉大学人民医院骨科,湖北 武汉 430060 2.武汉市第三医院中医科,湖北 武汉 430060 3.武汉大学人民医院风湿免疫科,湖北 武汉 430060 |
Author Name | Affiliation |
引用文本:
邓明1, 谢萍2, 马永刚1, 明江华1, 周炎1, 陈庆1, 刘志勇3, 刘世清1.慢病毒介导NGF过表达转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究[J].中国临床研究,2019,32(2):145-149.
邓明1, 谢萍2, 马永刚1, 明江华1, 周炎1, 陈庆1, 刘志勇3, 刘世清1.慢病毒介导NGF过表达转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究[J].中国临床研究,2019,32(2):145-149.