中文摘要: 摘要:目的 探讨奥沙利铂(L-OHP)耐药的人胃癌细胞(SGC-7901/L-OHP)在联合应用二甲双胍(DMBG)后增殖及凋亡的变化,并探讨其可能的作用机制。方法 首先使SGC-7901细胞在持续接触并梯次增加L-OHP浓度的条件下培养,建立SGC-7901/L-OHP细胞株,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测、计算DMBG及L-OHP单独使用时对SGC-7901/L-OHP的细胞增殖抑制率及半数抑制浓度(IC50),计算DMBG联合应用L-OHP后细胞增殖抑制率、IC50及逆转指数;流式细胞仪检测分析联合用药前后SGC-7901/L-OHP细胞周期分布及细胞凋亡的变化,逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)法检测细胞周期调节因子Cyclin D1 mRNA表达,Western blot法检测Cyclin D1 蛋白表达。结果 (1)MTT法检测结果:DMBG作用于SGC-7901/L-OHP 细胞48 h后IC50为(320.13±2.15)μg/ml,L-OHP 单独作用于SGC-7901/L-OHP细胞48 h后IC50 为(69.12±0.27)μg/ml,联用DMBG后的IC50降至(21.07±2.15)μg/ml,差异有统计学意义(P<0.05),逆转指数为3.28倍。(2)流式细胞仪检测结果:联合用药后各组细胞周期的构成情况有统计学差异(P<0.05),L-OHP+DMBG组SGC-7901/L-OHP细胞停留在G1期的比例最高,相应的停留在G2期及S期的细胞比例最低;细胞凋亡率分别为空白组(6.51±3.24)%,DMBG组(9.25±1.27)%,L-OHP 组(17.63±0.31)%,DMBG+L-OHP组(47.13± 3.26)%;依空白组、DMBG组、L-OHP 组、DMBG+L-OHP组之序,凋亡率递增(P<0.01),组间两两(除空白组与DMBG组间)比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(3)Cyclin D1 mRNA及蛋白检测结果:联用DMBG后Cyclin D1 mRNA及蛋白表达均较联合用药前明显下调(P均<0.05)。结论 L-OHP与DMBG联合应用能改变SGC-7901/L-OHP细胞周期分布,逆转SGC-7901/L-OHP细胞对L-OHP的耐药性,促进SGC-7901/L-OHP细胞凋亡。