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网络发布日期:2018-05-25
网络发布日期:2018-05-25
中文摘要: 目的:干预人肝癌细胞系Huh-7的野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因的表达,并观察其细胞生物学特性的变化。方法:采用转染法,将促进Wip1基因表达的质粒和抑制Wip1基因表达的小干扰RNA(siRNA)分别转染Huh-7细胞。质粒转染的Huh-7细胞为质粒转染组,未经质粒转染的为未转染组,siRNA转染的为siRNA干扰组,用Negative Control siRNA转染的为NC组。转染后,行Western blot、CCK-8、细胞划痕、Transwell实验,检测各组细胞生物学特性的变化。结果:质粒转染后,Huh-7细胞Wip1蛋白的表达上调,细胞增殖促进,增殖率在107.42%~176.36%之间。未转染组在0~24 h、~48 h、~72 h时的迁移距离分别小于质粒转染组:[(34.78±4.77)μm vs (61.60±2.02)μm,(33.98±3.48)μm vs (64.75±4.67)μm,(35.49±0.90)μm vs(67.89±4.23)μm,P均<0.01]。未转染组3次Transwell实验的细胞迁移数均少于质粒转染组:[(90.00±3.00)vs(178.67±5.77),(74.33±26.95)vs (209.00±32.91),(79.33±20.74)vs (208.67±73.24),P均<0.01]。siRNA转染后,Huh-7细胞Wip1蛋白的表达下调;细胞抑制率在12.37%~40.81%之间;NC组在0~24 h、~48 h、~72 h时的迁移距离分别大于siRNA干扰组:[(31.24±4.42)μm vs (16.04±6.21)μm,(31.33±2.13)μm vs (18.20±5.67)μm,(32.45±3.08)μm vs (18.99±5.32)μm,P均<0.01];NC组3次Transwell实验的细胞迁移数均多于siRNA干扰组:[(74.00±12.17)vs (33.00±10.44),(77.00±5.00)vs (32.67±2.08),(81.33±17.16)vs (29.30±2.51),P均<0.01]。结论:促进Huh-7细胞Wip1基因表达后,其Wip1蛋白的表达上调,细胞增殖、迁移、侵袭能力增强。抑制Huh-7细胞Wip1基因表达后,其Wip1蛋白的表达下调,细胞增殖、迁移、侵袭能力被抑制。
Abstract:
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文章编号: 中图分类号:R735.7 文献标志码:
基金项目:国家自然基金面上项目(81373172)
附件
作者 | 单位 |
李哲1,刘军2,李晓明1,赵丽娟1,路健1,吴灵潼1,李秉寿1 | 1.山东大学附属省立医院普外科,山东 济南 250021 2.山东大学附属省立医院器官移植肝胆外二科,山东 济南 250021 |
Author Name | Affiliation |
引用文本:
李哲1,刘军2,李晓明1,赵丽娟1,路健1,吴灵潼1,李秉寿1.干预Wip1基因对人肝癌细胞系Huh-7的影响[J].中国临床研究,2016,29(10):1297-1302.
李哲1,刘军2,李晓明1,赵丽娟1,路健1,吴灵潼1,李秉寿1.干预Wip1基因对人肝癌细胞系Huh-7的影响[J].中国临床研究,2016,29(10):1297-1302.