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网络发布日期:2018-06-26
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中文摘要: 目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响,探讨AGEs影响BMSCs成骨分化的机制。方法:(1)分离提取SD大鼠股骨、胫骨的BMSCs,采用贴壁法培养,传至第三代,用流式细胞仪进行细胞表型鉴定。(2)按处理方法将细胞分为实验组(AGEs组)和对照组(BSA组),分别给予0.2 mg/ml AGEs或牛血清白蛋白(BSA)成骨诱导液干预18 d,然后用茜素红染色,观察比较成骨矿化结节形成情况。(3)将第三代AGEs按处理方法分为正常组、对照组( BSA组)和实验组(AGEs组),正常组细胞不作特殊处理,对照组与实验组分别给予0.2 mg/ml的BSA和0.2 mg/ml的AGEs干预7d,用RNA提取试剂盒提取总RNA,然后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定成骨细胞分泌的I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)以及Wnt通路相关分子低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)mRNA的表达量。结果:(1)细胞从原代传至第三代的过程中,细胞外形由长梭形逐渐变至短棒状,并伸出多个突起,表型鉴定结果:第三代BMSCs特异性表面标志物CD44、CD90的阳性表达率分别为96.07%、99.34%,CD34的阴性表达率为0.19%。(2)与BSA组相比,AGEs组明显减少了矿化结节的形成。(3)Col-ⅠmRNA、LRP5 mRNA表达量在AGEs组和BSA组组间比较差异均有统计学意义(F=70.10,P=0.00;F=47.99,P=0.00)。结论:AGEs抑制BMSCs的增殖,并阻碍BMSCs向成骨细胞分化,此过程可能是通过干扰Wnt/LRP5/β-catenin通路来进行。
中文关键词: 晚期糖基化终末产物 骨髓间充质干细胞 成骨分化 I型胶原蛋白 低密度脂蛋白受体相关蛋白5
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文章编号: 中图分类号:R363 文献标志码:
基金项目:山西省科技厅社会发展基金资助项目(20130313022-4)
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张燕,高飞.晚期糖基化终末产物对SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制[J].中国临床研究,2016,29(2):145-148.
张燕,高飞.晚期糖基化终末产物对SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制[J].中国临床研究,2016,29(2):145-148.